由圖1所示，各菌種對(duì)發(fā)酵菜籽粕中粗蛋白質(zhì)含量均有一定的提高，其中以黑曲霉菌發(fā)酵菜籽粕中粗蛋白質(zhì)含量最高，達(dá)到38.4%，相對(duì)于空白樣(粗蛋白質(zhì)含量 34.09%)提高4.31個(gè)百分點(diǎn)。枯草芽孢桿菌發(fā)酵菜籽粕中粗蛋白質(zhì)含量也較高，達(dá)到37.9%。這可能與黑曲霉菌和枯草芽孢桿菌的酶系含有纖維素酶、木質(zhì)素酶、多糖酶等有關(guān)，其能夠分解纖維素和木質(zhì)素等多糖類物質(zhì)生產(chǎn)菌體蛋白，同時(shí)提高蛋白質(zhì)在菜籽粕中的相對(duì)含量。

2.1.2 各菌種對(duì)發(fā)酵菜籽粕多肽含量的影響(見圖2)

由圖2所示，各菌種對(duì)菜籽粕多肽含量均有一定的影響，黑曲霉菌發(fā)酵菜籽粕中多肽含量最高，達(dá)到3.682%，相對(duì)于空白樣1.002%，提高2.68個(gè)百分點(diǎn)。其次為枯草芽孢桿菌，多肽含量最低的為植物乳酸菌。研究發(fā)現(xiàn)，黑曲霉具有較高的分泌蛋白酶的能力，可以將蛋白質(zhì)進(jìn)一步分解為多肽類物質(zhì)，與本實(shí)驗(yàn)的結(jié)論相同。枯草芽孢桿菌同樣具有分泌蛋白酶的特性，其發(fā)酵菜籽粕中多肽含量?jī)H次于黑曲霉菌。植物乳酸菌發(fā)酵菜籽粕中多肽含量最低，這可能與植物乳酸菌的酶系以糖酶、脂肪酶、產(chǎn)酸酶為主，對(duì)蛋白質(zhì)的分解能力較差，無(wú)法將菜籽粕中的蛋白質(zhì)進(jìn)一步分解為多肽類物質(zhì)。

2.2 混菌發(fā)酵菌種組合正交實(shí)驗(yàn)

按照1.2.4實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行混菌發(fā)酵菌種組合正交實(shí)驗(yàn)。正交實(shí)驗(yàn)因素水平見表 1，混菌發(fā)酵菌種組合L27(313)正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表2。

由圖2所示，各菌種對(duì)菜籽粕多肽含量均有一定的影響，黑曲霉菌發(fā)酵菜籽粕中多肽含量最高，達(dá)到3.682%，相對(duì)于空白樣1.002%，提高2.68個(gè)百分點(diǎn)。其次為枯草芽孢桿菌，多肽含量最低的為植物乳酸菌。研究發(fā)現(xiàn)，黑曲霉具有較高的分泌蛋白酶的能力，可以將蛋白質(zhì)進(jìn)一步分解為多肽類物質(zhì)，與本實(shí)驗(yàn)的結(jié)論相同。枯草芽孢桿菌同樣具有分泌蛋白酶的特性，其發(fā)酵菜籽粕中多肽含量?jī)H次于黑曲霉菌。植物乳酸菌發(fā)酵菜籽粕中多肽含量最低，這可能與植物乳酸菌的酶系以糖酶、脂肪酶、產(chǎn)酸酶為主，對(duì)蛋白質(zhì)的分解能力較差，無(wú)法將菜籽粕中的蛋白質(zhì)進(jìn)一步分解為多肽類物質(zhì)。

2.2 混菌發(fā)酵菌種組合正交實(shí)驗(yàn)

按照1.2.4實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行混菌發(fā)酵菌種組合正交實(shí)驗(yàn)。正交實(shí)驗(yàn)因素水平見表 1，混菌發(fā)酵菌種組合L27(313)正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表2。

由表3所示，在混菌發(fā)酵提高菜籽粕粗蛋白質(zhì)含量的各菌種中，黑曲霉菌的影響達(dá)到差異顯著水平(P＜0.05)，其他各菌種的影響未達(dá)到差異顯著水平(P＞0.05)，說(shuō)明黑曲霉菌是混菌發(fā)酵提高菜籽粕粗蛋白質(zhì)含量的主要因素。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，混菌發(fā)酵提高菜籽粕粗蛋白質(zhì)含量的菌種組合中黑曲霉菌是必備的。各菌種在混菌發(fā)酵提高菜籽粕粗蛋白質(zhì)含量的影響中沒有顯著的交互作用。

在混菌發(fā)酵提高菜籽粕多肽含量的各菌中，黑曲霉菌的影響達(dá)到差異極顯著水平(P＜0.01)，枯草芽孢桿菌的影響達(dá)到差異顯著水平(P＜0.05)，說(shuō)明提高菜籽粕多肽含量主要受黑曲霉菌和枯草芽孢桿菌的影響，植物乳酸菌的影響未達(dá)到差異顯著水平(P＞0.05)。各菌種在混菌發(fā)酵提高菜籽粕多肽含量的影響中沒有顯著的交互作用。因此，混菌發(fā)酵提高菜籽粕多肽含量需要添加黑曲霉菌和枯草芽孢桿菌。

綜合考慮，混菌發(fā)酵中黑曲霉菌和枯草芽孢桿菌對(duì)提高菜籽粕粗蛋白質(zhì)含量和多肽含量作用明顯，是必須添加的。因此，選擇黑曲霉菌和枯草芽孢桿菌接種量均為 6%(表2中的實(shí)驗(yàn)號(hào)18和實(shí)驗(yàn)號(hào)26)。由于植物乳酸菌在前期篩選中對(duì)硫甙去除作用明顯，為獲得高蛋白多肽菜籽粕的同時(shí)保證菜籽粕的低毒，選擇按4%接種量添加植物乳酸菌。因此，混菌發(fā)酵菌種組合為植物乳酸菌、黑曲霉菌、枯草芽孢桿菌，接種量分別為4%、6%、6%。

2.3 混菌發(fā)酵條件正交實(shí)驗(yàn)

按照2.2選出的最佳菌種組合(植物乳酸菌、黑曲霉菌、枯草芽孢桿菌接種量分別為4%、6%、6%)進(jìn)行混菌發(fā)酵接種，按照1.2.5實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行混菌發(fā)酵條件正交實(shí)驗(yàn)。混菌發(fā)酵條件的正交實(shí)驗(yàn)因素水平見表4，混菌發(fā)酵條件L9(34)正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表5。

由表5所示，對(duì)混菌發(fā)酵提高菜籽粕粗蛋白質(zhì)含量影響因素最大的是發(fā)酵時(shí)間，其次是水料比，影響最小的是發(fā)酵溫度;各因素的較優(yōu)水平為發(fā)酵溫度34℃、水料比1.7∶1、發(fā)酵時(shí)間48h。混菌發(fā)酵提高菜籽粕多肽含量影響因素最大的是發(fā)酵時(shí)間，其次是水料比，影響最小的是發(fā)酵溫度;各因素的較優(yōu)水平為發(fā)酵溫度34℃、水料比1.7∶1、發(fā)酵時(shí)間48h。

利用SAS 9.0對(duì)上述正交實(shí)驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表6。

由表6所示，在混菌發(fā)酵提高菜籽粕粗蛋白質(zhì)含量的各因素中，發(fā)酵時(shí)間的影響達(dá)到差異顯著水平(P＜0.05)，發(fā)酵溫度和水料比的影響差異不顯著(P＞0.05)。在混菌發(fā)酵提高菜籽粕多肽含量的各因素中，發(fā)酵時(shí)間、發(fā)酵溫度、水料比的影響均達(dá)到差異極顯著水平(P＜0.01)，表明各菌種產(chǎn)蛋白酶分解多肽的過(guò)程對(duì)各發(fā)酵因素比較敏感。

綜合分析，采用植物乳酸菌、黑曲霉菌、枯草芽孢桿菌接種量分別為4%、6%、6%，在發(fā)酵溫度4℃、水料比1.7∶1、發(fā)酵時(shí)間48h條件下進(jìn)行混菌發(fā)酵，發(fā)酵菜籽粕粗蛋白質(zhì)含量為42.5%，多肽含量為7.86%。并在上述條件下對(duì)菜籽粕發(fā)酵前后的營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表7。

由表7所示，發(fā)酵后的菜籽粕粗蛋白質(zhì)含量和多肽含量較發(fā)酵前均有所增加，菜籽粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子硫甙含量、植酸含量及單寧含量都較發(fā)酵前大幅下降。可見菜籽粕經(jīng)混菌發(fā)酵后質(zhì)量得到了提高。

3 結(jié)論

(1)在單菌發(fā)酵實(shí)驗(yàn)中，菜籽粕經(jīng)植物乳酸菌、黑曲霉菌、枯草芽孢桿菌發(fā)酵48 h后粗蛋白質(zhì)含量和多肽含量均有提高，其中黑曲霉菌的作用最明顯，菜籽粕粗蛋白質(zhì)含量和多肽含量分別達(dá)到38.4%和3.682%。

(2)混菌發(fā)酵效果優(yōu)于單菌發(fā)酵，混菌發(fā)酵的最佳菌種組合為植物乳酸菌、黑曲霉菌、枯草芽孢桿菌接種量分別為4%、6%、6%，優(yōu)化的發(fā)酵條件為水料比 1.7∶1、34℃下發(fā)酵48h。在上述最優(yōu)條件下菜籽粕粗蛋白質(zhì)含量42.5%，多肽含量7.86%，抗?fàn)I養(yǎng)因子硫甙含量降至21.637μmol/g、植酸含量0.27%、單寧含量 0.41mg/g，得到高蛋白、多肽、低毒的菜籽粕飼料。

實(shí)戰(zhàn)操作技術(shù)——棉菜籽餅脫毒變身優(yōu)質(zhì)飼料替代豆粕操作新技術(shù)

當(dāng)前豆粕價(jià)格很高有些地方貨源緊缺，而棉菜籽餅（棉籽粕、菜籽粕）價(jià)格相對(duì)便宜，棉菜籽餅是棉子、油菜籽榨油后剩下的餅狀殘?jiān)鞍踪|(zhì)含量較高，含有各種氨基酸成分。但由于棉菜籽餅中含有植酸、芥子堿等物質(zhì)，這些物質(zhì)含有一定的毒性，還會(huì)影響動(dòng)物的消化吸收，不能大量使用，因此不建議直接飼喂給動(dòng)物！

現(xiàn)在通過(guò)微生物飼料發(fā)酵劑的除毒脫毒技術(shù)，可以成功將菜籽餅變?yōu)閮?yōu)質(zhì)添加飼料，直接按照1公斤發(fā)酵的棉菜籽餅（發(fā)酵前的重量）代替約0.85公斤豆粕進(jìn)行使用。飼料發(fā)酵劑中的有益微生物，在發(fā)酵過(guò)程中分泌的代謝產(chǎn)物，可將棉菜籽餅中的毒性物質(zhì)等有效分解。

豆粕、菜粕、棉粕成分對(duì)比

1.豆粕是一種高蛋白原料，無(wú)需脫毒即可用作飼料。其中蛋白質(zhì)含量為40%-48%，賴氨酸含量為2.5%-3.0%，色氨酸含量為0.6%-0.7%，蛋氨酸含量為0.5%-0.7%。2020年11月12日?qǐng)?bào)價(jià)每噸在3500元左右。

2.菜粕的粗蛋白含量在34%-38%之間，特點(diǎn)是蛋氨酸含量高（僅次于芝麻餅、粕），賴氨酸含量亦高。而精氨酸含量低，是餅、粕飼料中含量最低的。菜籽粕的有效能值偏低（淀粉含量低、菜籽殼難以消化利用）。礦物質(zhì)中，鈣和磷的含量均高，硒和錳的含量亦高。特別是硒的含量是常用植物飼料中最高的。2020年11月12日?qǐng)?bào)價(jià)每噸在2900元左右。

3.棉粕蛋白質(zhì)含量一般為44.32%，僅次于豆粕的蛋白質(zhì)含量48%，而高于菜籽粕的蛋白質(zhì)含量36.04%。精氨酸含量高達(dá)3.6%-3.8%，而賴氨酸含量?jī)H有1.3%-l.5%，只有豆粕的一半。2020年11月12日?qǐng)?bào)價(jià)每噸在3000元左右。

是否需要脫毒處理

1.豆粕無(wú)需經(jīng)過(guò)脫毒即可用作飼料。而且豆粕中富含蛋白質(zhì)和多種氨基酸，在不需要額外加入動(dòng)物性蛋白的情況下，僅豆粕中含有的蛋白質(zhì)和氨基酸足以平衡家禽和豬的食譜，促進(jìn)它們的營(yíng)養(yǎng)吸收。只有當(dāng)其他粕類單位蛋白成本遠(yuǎn)低于豆粕時(shí)，豆粕才有可能被替代。

2.菜粕菜籽中含有硫葡萄糖苷、芥酸、單寧、皂角苷等不良成分，其中主要是硫葡萄糖苷。硫葡萄糖苷本身無(wú)毒，但在一定溫度和水分條件下，經(jīng)過(guò)菜籽本身含有的芥子酶的酶解作用而產(chǎn)生異硫氰酸酯、唑烷硫酮和腈類等有害物質(zhì)。這些物質(zhì)可引起甲狀腺腫大，從而造成動(dòng)物生長(zhǎng)速度下降，繁殖力減退。單寧則妨礙蛋白質(zhì)的消化，降低適口性。而芥酸阻撓脂肪代謝，造成心臟脂肪蓄積及生長(zhǎng)受到抑制。。使用前需進(jìn)行一定的脫毒處理，并且使用時(shí)要加以限制，具體喂量應(yīng)根據(jù)菜粕中有害成分含量而定。經(jīng)過(guò)脫毒處理的菜籽粕喂量可以加大，而“雙低”油菜籽生產(chǎn)的菜粕喂量要受限制。同時(shí)，應(yīng)結(jié)合菜粕的氨基酸組成特點(diǎn)，適當(dāng)搭配其它餅粕。

3.棉籽中含有對(duì)動(dòng)物有害的棉酚及環(huán)丙烯脂肪酸，尤其是棉酚的危害很大。在制油過(guò)程中，由于蒸炒，壓榨等熱作用，大部分棉酚與蛋白質(zhì)、氨基酸結(jié)合而變成結(jié)合棉酚，結(jié)合棉酚在動(dòng)物消化道內(nèi)不被動(dòng)物吸收，故毒性很小。另一部分棉酚則以游離形式存在于餅、粕及油品中，這部分游離棉酚對(duì)動(dòng)物毒性較大，尤其單胃動(dòng)物過(guò)量攝取或攝取時(shí)間較長(zhǎng)，可導(dǎo)致生長(zhǎng)遲緩、繁殖性能及生產(chǎn)性能下降，甚至導(dǎo)致死亡。幼小動(dòng)物對(duì)棉酚的耐受能力更低。由于棉籽餅、粕中游離棉酚對(duì)動(dòng)物有害，因此，在使用棉餅、粕時(shí)，要根據(jù)飼喂對(duì)象及餅粕中游離棉酚的含量加以限量。反芻家畜在有優(yōu)質(zhì)粗料及多汁青料的情況下，棉籽餅、粕的用量不受限制，不會(huì)造成中毒。對(duì)單胃動(dòng)物要限制喂量，最好使用經(jīng)過(guò)脫毒處理的棉籽餅粕。同時(shí)，使用棉籽餅、粕配制飼糧要注意氨基酸平衡，尤其是棉籽餅、粕的賴氨酸含量低，且利用率差，應(yīng)注意添加賴氨酸。

發(fā)酵操作技術(shù)

發(fā)酵棉菜籽餅其實(shí)也是一個(gè)脫毒技術(shù)，具體操作如下：

1.仔細(xì)檢查棉菜籽餅，剔除棉菜籽餅中嚴(yán)重變質(zhì)發(fā)霉的部分，輕度發(fā)霉的原料可以忽略，因?yàn)槲⑸锇l(fā)酵能夠脫霉。

2.將棉菜籽餅粉碎并添加適量的玉米粉淀粉類的能量飼料等，調(diào)節(jié)飼料營(yíng)養(yǎng)比例。

3.每噸棉菜籽餅加入2公斤食鹽、玉米粉（其它淀粉、面粉次粉等也可以，或者粉碎的生紅薯300公斤也可以）100公斤、“99多功能飼料發(fā)酵劑”1包（500g/包，市場(chǎng)售價(jià)約25元，以高濃度乳酸菌、酵母菌、復(fù)合酶制劑的專業(yè)發(fā)酵劑）。

4.在混合物料中添加適量水分，使混合物料含水量保持在55%左右，以“手抓一把并緊握，無(wú)水滴落，松手后輕觸即散”為宜，一般上述配方中需要加入清水約500-600公斤。

5.發(fā)酵方式根據(jù)實(shí)際環(huán)境條件各異，在桶、缸、塑料袋等容器中發(fā)酵均可。

6.發(fā)酵時(shí)要盡可能排盡空氣進(jìn)行密封發(fā)酵。如果使用的發(fā)酵容器有密封不嚴(yán)實(shí)的隱患，要在一開始就在其外層包裹一層塑料袋并扎緊。發(fā)酵過(guò)程中不能啟封。

7.發(fā)酵時(shí)間受環(huán)境溫度影響，通常夏季發(fā)酵2-3天，冬季發(fā)酵5-7天即可完成。發(fā)酵完成后，有較為強(qiáng)烈的酸香味，ph值在3-4。

規(guī)模運(yùn)用混合發(fā)酵現(xiàn)場(chǎng)

塑料缸、飼料袋（有內(nèi)膜）均可做發(fā)酵飼料

采用池子發(fā)酵

發(fā)酵完成的棉菜粕飼喂動(dòng)物技術(shù)

需要注意的是，發(fā)酵后的飼料酸度較低，不可以取代禽畜全部日糧。其他類發(fā)酵飼料同理。飼喂時(shí)根據(jù)不同情況，將發(fā)酵飼料按照一定比例添加到日糧中，發(fā)酵完成的棉菜粕為濕料，具體使用量每大概1.5-2公斤發(fā)酵棉菜粕（濕料）代替動(dòng)物日糧配方中1公斤豆粕的使用量進(jìn)行代替使用，與其它飼料混合后直接飼喂，由于棉菜籽粕蛋白較高，最高使用量不要超過(guò)禽畜日糧飼喂量的40%（濕料重量）。如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵飼料過(guò)酸適口性變差，可在飼喂前在陽(yáng)光下曬1-2小時(shí)，或添加適量的碳酸氫鈉（小蘇打）即可改善。

發(fā)酵過(guò)程中與發(fā)酵后使用過(guò)程中，發(fā)酵的容器要一直保持密封狀態(tài)，可以長(zhǎng)時(shí)間保存（一年左右）。

當(dāng)前養(yǎng)殖業(yè)成本高居不下，而飼料成本是其中最高的，利用廉價(jià)原料發(fā)酵飼料（包括一些輕度發(fā)霉的粕類低價(jià)收回）是極佳解決辦法。通過(guò)微生物飼料發(fā)酵劑的發(fā)酵作用，可以將輕度霉變飼料變成優(yōu)質(zhì)飼料，將不易消化的物質(zhì)分解為可被畜禽吸收的小分子糖類、氨基酸等。同時(shí)發(fā)酵飼料中富含有益微生物、酶制劑、酸化劑等，可調(diào)節(jié)畜禽腸胃微生態(tài)環(huán)境并進(jìn)一步提高飼料利用率。發(fā)酵飼料氣味清香，提高了飼料的適口性，加上發(fā)酵飼料中有大約4℃的酒度，能夠促進(jìn)動(dòng)物新陳代謝促進(jìn)健康抵御疾病，是當(dāng)前養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展中重要的一環(huán)。

本技術(shù)也可以同樣發(fā)酵菜籽粕（餅）、棕櫚粕等，方法同上。

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2020年已全面禁抗，我們之前經(jīng)常在飼料中添加的抗生素進(jìn)行促生長(zhǎng)行為將是違法，否則面臨巨額罰單。如何既能夠促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)又能夠形成無(wú)抗養(yǎng)殖呢？其實(shí)中草藥在促進(jìn)畜禽養(yǎng)殖健康和生長(zhǎng)、改善肉蛋奶品質(zhì)大有可為，特別是將中草藥發(fā)酵后效果提升4-28倍等好處，這個(gè)實(shí)施方案比你想象中效果更好，運(yùn)用的沒有不被效果折服的，值得嘗試驗(yàn)證

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