2.1.2 酵母Z4培養(yǎng)方法

（1）一級放大培養(yǎng)：配制YPD液體培養(yǎng)基，500mL三角瓶裝200g，滅菌冷卻至室溫后，接活化菌種3～4環(huán)，35℃，160rpm，搖床培養(yǎng)至酵母數(shù)2億個/mL。

（2）二級放大培養(yǎng)：取培養(yǎng)液200g，添加20%糖化醪和0.3%尿素（按糖化醪量算）后，裝至500mL三角瓶中，接一級菌種5%，35℃，160rpm，搖床培養(yǎng)至酵母數(shù)>1億個/mL。

（3）一代酵母泥菌種：取清液1L，分裝2瓶，每個1000mL三角瓶裝500g，接二級菌種5%，35℃，160rpm，搖床培養(yǎng)1d。發(fā)酵結束，將菌液放到1L量筒中靜置分層3h，倒掉3/4上清液，獲得一代酵母泥菌種250g，酵母數(shù)＞1億/mL。

（4）二代酵母泥菌種：取清液1L，分裝2瓶，每個1000mL三角瓶裝500g，接種一代酵母泥菌種5%，35℃，160rpm，搖床培養(yǎng)1d。發(fā)酵結束，將菌液放到1L量筒中靜置分層3h，倒掉3/4上清液，獲得二代酵母泥菌種250g，酵母數(shù)＞1億/mL。

2.1.3 乳酸菌的培養(yǎng)方法

（1）配置MRS液體培養(yǎng)基1瓶，500mL三角瓶中裝200g。

（2）接10%新鮮酸奶至MRS液體培養(yǎng)基中，35℃，靜置培養(yǎng)1d。

（3）培養(yǎng)結束，采用MRS固體培養(yǎng)基涂板法，在35℃，培養(yǎng)3d，計數(shù)菌落數(shù)。

2.2 固體飼料發(fā)酵實驗

按照不同的乳酸菌添加方式分別制備4種固體飼料進行同步發(fā)酵實驗，在發(fā)酵過程中觀察飼料的變化情況，進行比較，發(fā)酵結束后檢測飼料的水分、蛋白含量。發(fā)酵工藝如圖3

2.2.1 飼料樣品的發(fā)酵（1#樣品）

取新鮮濕糟（水分約70%）500g放入發(fā)酵塑料盒中，添加8%豆粕，1.8%尿素，磷酸二氫鉀0.05%，1%的黑曲霉F1菌液和5%的二代酵母泥菌液，添加1%的乳酸菌菌液，攪拌均勻，35℃，培養(yǎng)2d（輔料添加比例及接種量按濕糟的絕干重計）。

2.2.2 飼料樣品的發(fā)酵（2#樣品）

取新鮮濕糟（水分約70%）500g放入發(fā)酵塑料盒中，添加8%豆粕，1.8%尿素,磷酸二氫鉀0.05%，添加1%的黑曲霉F1菌液和5%的二代酵母泥菌液，攪拌均勻，35℃，培養(yǎng)24h。發(fā)酵24h后，添加1%的乳酸菌菌液，攪拌均勻，裝入密封塑料袋，35℃，厭氧發(fā)酵1d（輔料添加比例及接種量按濕糟的絕干重計）。

2.2.3 飼料樣品的發(fā)酵（3#樣品）

取新鮮濕糟（水分約70%）500g放入發(fā)酵塑料盒中，添加8%豆粕，1.8%尿素,磷酸二氫鉀0.05%，添加1%的黑曲霉F1菌液和5%的二代酵母泥菌液，攪拌均勻，35℃，培養(yǎng)24h。發(fā)酵24h后，添加1%的乳酸菌菌液，攪拌均勻，35℃，好氧發(fā)酵1d（輔料的添加比例及接種量按濕糟的絕干重計）。

2.2.4 飼料樣品的發(fā)酵（4#樣品）

取新鮮濕糟（水分約70%）500g放入發(fā)酵塑料盒中，添加8%豆粕，1.8%尿素，磷酸二氫鉀0.05%，添加1%的黑曲霉F1菌液和5%的二代酵母泥菌液，攪拌均勻，35℃，發(fā)酵培養(yǎng)48h（輔料的添加比例及接種量按濕糟的絕干重計）。發(fā)酵24h、48h時，攪拌物料，并觀察黑曲霉、酵母生長情況，及物料的水分、氣味變化。發(fā)酵結束，檢測粗蛋白、乳酸菌菌數(shù)、pH。

2.3 檢測方法

水分：快速水分測定儀法。

蛋白質：采用凱氏定氮法（參照國標GBT6432-1994）。

2.4 檢測結果及分析

四種樣品的發(fā)酵情況見表1。

為數(shù)據(jù)進行結果分析。整理如表1。

實驗結果表明：

（1）發(fā)酵初始時添加1%的乳酸菌，并進行好氧發(fā)酵（1#樣品）：

發(fā)酵過程，木薯渣蛋白 16.54%，物料水分維持在 56% 左右，沒有發(fā)現(xiàn)霉菌菌絲大量生長，物料pH4.5-5.5；發(fā)酵24h，有淡淡的霉味，酵母數(shù)達10億個/g；發(fā)酵48h，物料結塊，沒有乳酸味，乳酸菌未檢出，酵母數(shù)達16億個/g，產(chǎn)品蛋白24.79%，較原來提高了49.88%。

（2）發(fā)酵24h后添加1%的乳酸菌，并進行厭氧發(fā)酵（2#樣品）：

發(fā)酵過程，木薯渣蛋白16.54%，物料水分維持在56%左右，沒有發(fā)現(xiàn)霉菌菌絲大量生長，物料pH4.5-5.5；發(fā)酵24h，有淡淡的霉味，酵母數(shù)達14億個/g；發(fā)酵48h，物料松散且有明顯乳酸味，乳酸菌數(shù)6億個/g，酵母數(shù)達16億個/g，產(chǎn)品蛋白25.81%，較原來提高了56.04%。

（3）發(fā)酵24h后添加1%的乳酸菌，并進行好氧發(fā)酵（3#樣品）：

發(fā)酵過程，木薯渣蛋白16.54%，物料水分維持在56%左右，沒有發(fā)現(xiàn)霉菌菌絲大量生長，物料pH4.5-5.5；發(fā)酵24h，有淡淡的霉味，酵母數(shù)達14億個/g；發(fā)酵48h，物料輕微結塊，有輕微乳酸味，乳酸菌數(shù)3億個/g，酵母數(shù)10億個/g，產(chǎn)品蛋白27.68%，較原來提高了67.35%。

（4）發(fā)酵過程中沒有添加乳酸菌，并進行好氧發(fā)酵（4#樣品）：

發(fā)酵過程，木薯渣蛋白 16.54%，物料水分維持在 56% 左右，沒有發(fā)現(xiàn)霉菌菌絲大量生長，物料pH4.5-5.5；發(fā)酵24h，有淡淡的霉味，酵母數(shù)達14億個/g；發(fā)酵48h，物料結塊，沒有乳酸味，乳酸菌未檢出，酵母數(shù)5.8億個/g，產(chǎn)品蛋白24.6%，較原來提高了48.73%。

將表1所述實驗數(shù)據(jù)畫成折線圖以便于分析，得圖1。

由圖1可知，物料粘度隨淀粉比例的增加而增大，相同的溫度和剪切速率下，淀粉比例越大物料粘度越大，且淀粉比例大于15%時，粘度隨淀粉比例變化速度加快。

3 結論

綜上所述，發(fā)酵過程，木薯渣蛋白16.54%，物料水分維持在56%左右，沒有發(fā)現(xiàn)霉菌菌絲大量生長，物料pH4.5-5.5；發(fā)酵結束，添加乳酸菌的樣品蛋白提高率為 50% 以上，較空白樣（48.73%）高，酵母數(shù)都高于空白樣，且發(fā)酵24h添加乳酸菌的樣品，物料較疏松，乳酸菌數(shù)較多，有乳酸清香味，霉味較淡。

4 結論

通過本實驗分析，餐廚垃圾經(jīng)初步固液分離后，淀粉比例對固液分離剩余物的粘度起到很大作用，比例大于15%時現(xiàn)象尤為顯著。所以，在餐廚垃圾固液分離剩余物的處理中，可通過適當降低漿料中淀粉比例以降低其粘度，提高固液分離效率及剩余物的處理效率。

【視頻】部分發(fā)酵飼料養(yǎng)豬雞鴨帶給你無臭味健康無抗養(yǎng)殖效果

相關鏈接：99多功能飼料發(fā)酵劑——高濃度乳酸菌為主的固態(tài)飼料發(fā)酵劑，更輕易成功、效果更好的生物飼料發(fā)酵劑，簡單好用的中草藥發(fā)酵劑

廣西助農(nóng)畜牧科技有限公司提供全方位支撐

2020年已全面禁抗，我們之前經(jīng)常在飼料中添加的抗生素進行促生長行為將是違法，否則面臨巨額罰單。如何既能夠促進動物生長又能夠形成無抗養(yǎng)殖呢？其實中草藥在促進畜禽養(yǎng)殖健康和生長、改善肉蛋奶品質大有可為，特別是將中草藥發(fā)酵后效果提升4-28倍等好處，這個實施方案比你想象中效果更好，運用的沒有不被效果折服的，值得嘗試驗證

我們的技術僅需在出欄前半個月左右運用益生菌+酶制劑+中草藥相關的無違禁安全產(chǎn)品，肉質改善非常顯著，且可以批量化生產(chǎn)。

目前我們已經(jīng)有了成熟的技術、產(chǎn)品和運用方案，且有大量成功案例，可以在短時間、批量化、安全無違禁地為您的養(yǎng)殖場生產(chǎn)出高品質的家畜、家禽、水產(chǎn)產(chǎn)品。

規(guī)模養(yǎng)殖場養(yǎng)殖公司我們提供產(chǎn)品樣品、驗證效果和通過檢測后您再放心地規(guī)模化運用。

微信公眾號：gxzn-99

微信號：gxzn07713815862

電話：0771-2204816，3800156,3815862

網(wǎng)站：www.glendi.net， www.zn99.com

淘寶店：gxzn99.taobao.com

微店：weidian.com/?userid=1353707843 

產(chǎn)品購買微信轉賬請?zhí)砑?8076549930或15578100088為好友（還可以咨詢技術與業(yè)務問題）

相關鏈接——農(nóng)業(yè)農(nóng)村部鼓勵企業(yè)和研發(fā)機構加快生物飼料、酶制劑、益生菌、植物提取物等抗生素替代產(chǎn)品開發(fā)，推動全行業(yè)抗生素減量替代，確保畜禽產(chǎn)品質量安全