魚粉供應(yīng)不足，價(jià)格居高不下，魚粉替代技術(shù)研究已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域熱點(diǎn)問題，豆粕粗蛋白質(zhì)含量高、價(jià)格低且氨基酸分布相對(duì)平衡，是魚粉主要替代蛋白源之一,但豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子會(huì)損傷水生動(dòng)物腸道健康，降低水生動(dòng)物的生產(chǎn)性能，限制了其在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用。微生物發(fā)酵可最大限度消除豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子，增加豆粕中粗蛋白質(zhì)、小肽和游離氨基酸含量，并產(chǎn)生寡肽、谷氨酸、益生菌、維生素、乳酸、未知生長(zhǎng)因子等生物活性物質(zhì)顯示出比豆粕更好的魚粉替代效應(yīng)。近年來，在大口黑鱸、石斑魚,凡納濱對(duì)蝦和異育銀鯽等水產(chǎn)養(yǎng)殖品種上的研究表明，以適宜比例發(fā)酵豆粕替代飼料中的魚粉，可以提高動(dòng)物消化酶活性、抗氧化能力以及免疫功能，改善肌肉品質(zhì)，且不會(huì)對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物生長(zhǎng)性能產(chǎn)生不利影響。

湘云鯽是由二倍體母本和異源四倍體父本雜交培育而來的三配體淡水新品種，具有食性廣、生長(zhǎng)迅速、抗逆性強(qiáng)、耐低氧、耐低溫等優(yōu)點(diǎn)，是目前國(guó)內(nèi)個(gè)體最大的優(yōu)質(zhì)鯽魚，市場(chǎng)潛力巨大，然而目前鮮有發(fā)酵豆粕在湘云鯽飼料中的應(yīng)用效果報(bào)道。基于此，本試驗(yàn)以發(fā)酵豆粕替代湘云鯽飼料中的部分魚粉和豆粕，研究其對(duì)湘云鯽生長(zhǎng)性能、腸道及肝臟健康的影響，為發(fā)酵豆粕在湘云鯽飼料中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

材料和方法

1.1試驗(yàn)飼料

以魚粉、肉粉、發(fā)酵豆粕、豆粕等為蛋白源，大豆油為脂肪源配制成2組等氮（37%）等脂（7.8%）的試驗(yàn)飼料，對(duì)照組為魚粉組（FM組），添加發(fā)酵豆粕的試驗(yàn)飼料為發(fā)酵豆粕替代組（FSM組）。為避免限制性氨基酸差異對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響，F(xiàn)SM組添加0.02%的蛋氨酸和0.1%的賴氨酸，使其蛋氨酸及賴氨酸含量與FM組近似相等。飼料組成及主要營(yíng)養(yǎng)成分見表1。飼料原料均購(gòu)于重慶新希望飼料有限公司，粉碎后過60目篩，用轉(zhuǎn)鼓式混合機(jī)混合均勻，制成直徑2.5mm的飼料，風(fēng)干后-20℃保存。

1.2試驗(yàn)魚飼養(yǎng)與管理

試驗(yàn)漁場(chǎng)，用1%食鹽消毒后，以商品飼料暫養(yǎng)1周。選擇體質(zhì)健康、個(gè)體均勻、體重為（37.26±0.16）g的試驗(yàn)魚160尾，隨機(jī)置于8個(gè)圓柱形水族缸，容積（500L）中，分為2組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)缸20尾。

每天8:30、12:30、17:00飽食投喂3次，養(yǎng)殖周期56d。養(yǎng)殖水源尾曝氣自來水，飼養(yǎng)期間水溫22～26℃，溶解氧>6.0mg/L，pH6.5～7.5，氨氮含量<0.5mg/L，亞硝酸鹽<0.05mg/L。

1.3樣品采集

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，停食24h，MS-222（0.01%）麻醉，分別計(jì)數(shù)、稱重。每重復(fù)隨機(jī)取5尾魚測(cè)定體重、體長(zhǎng)，從尾靜脈抽取靜脈血于EDTA-Na抗凝管中，靜置后4000g離心10min，取上層血漿存于-80℃冰箱中保存待用。每重復(fù)隨機(jī)取5尾魚，于冰盤中解剖，分離腸道、肝臟、肌肉，液氮速凍后于-80℃保存?zhèn)溆谩４送猓恐貜?fù)隨機(jī)取3尾魚，取前腸、肝臟于4%多聚甲醛中固定備用，用于石蠟切片的制備。

1.4數(shù)據(jù)分析

采用SPSS22.0對(duì)數(shù)據(jù)采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)比較分析組間差異，顯著水平為P<0.05。試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”（Mean±SD）形式表示。

試驗(yàn)結(jié)果

2.1發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，F(xiàn)M組與FSM組間湘云鯽的終末均重、增重率、特定生長(zhǎng)率、尾均攝食量、餌料系數(shù)、肥滿度、臟體比、肝體比、干物質(zhì)沉積率、蛋白質(zhì)沉積率和脂肪沉積率均無顯著差異（P>0.05）。 

2.2發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽體組成的影響

由表3可知，與FM組相比，F(xiàn)SM組湘云鯽肌肉粗蛋白質(zhì)含量顯著提高（P<0.05），粗灰分含量顯著降低（P

2.3發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽腸道健康的影響

2.3.1發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

由圖1可觀察到兩組腸道絨毛結(jié)構(gòu)均完整，無絨毛脫落現(xiàn)象。由表4可知，F(xiàn)M組與FSM組腸道絨毛數(shù)目與高度均無顯著差異（P>0.05）。

2.3.2發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽腸道黏膜通透性的影響

由表5可知，與FM組相比，F(xiàn)SM組血漿D-乳酸含量顯著降低了21.5%（P

2.3.3發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽腸道消化吸收功能的影響

由表6可知袁與FM組相比袁F(xiàn)SM組腸道脂肪酶活性顯著提高了10.2%（P

2.3.4發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽腸道抗氧化能力的影響

由表7可知，F(xiàn)SM組腸道總超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量與FM組間無顯著差異（P>0.05）。2.4發(fā)酵豆粕替代魚粉對(duì)湘云鯽肝臟結(jié)構(gòu)功能的影響

2.4.1發(fā)酵豆粕替代魚粉對(duì)湘云鯽肝臟形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽肝臟結(jié)構(gòu)影響見肝臟圖2。FM組和FSM組肝細(xì)胞索明顯，排列較整齊，肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整遙

2.4.2發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽血漿生化指標(biāo)的影響

由表8可知，與FM組相比，F(xiàn)SM組血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性、總膽固醇含量顯著降低（P<0.05），其中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性降低了11.3%，總膽固醇含量降低了23.1%，溶菌酶活性、免疫球蛋白M含量顯著提高（P

2.4.3發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽肝臟抗氧化能力的影響

由表9可知，F(xiàn)M組與FSM組肝臟總抗氧化能力、總超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量均無顯著差異（P>0.05）。 

試驗(yàn)結(jié)論

綜上，在等氮等脂等賴氨酸等蛋氨酸前提下，以12%發(fā)酵豆粕替代飼料中部分魚粉和豆粕，可在不影響湘云鯽幼魚生長(zhǎng)性能及飼料利用的前提下，提高湘云鯽肌肉蛋白質(zhì)含量，促進(jìn)脂質(zhì)代謝，增強(qiáng)免疫機(jī)能。

實(shí)戰(zhàn)操作技術(shù)——棉菜籽餅脫毒變身優(yōu)質(zhì)飼料替代豆粕操作新技術(shù)

當(dāng)前豆粕價(jià)格很高有些地方貨源緊缺，而棉菜籽餅（棉籽粕、菜籽粕）價(jià)格相對(duì)便宜，棉菜籽餅是棉子、油菜籽榨油后剩下的餅狀殘?jiān)鞍踪|(zhì)含量較高，含有各種氨基酸成分。但由于棉菜籽餅中含有植酸、芥子堿等物質(zhì)，這些物質(zhì)含有一定的毒性，還會(huì)影響動(dòng)物的消化吸收，不能大量使用，因此不建議直接飼喂給動(dòng)物！

現(xiàn)在通過微生物飼料發(fā)酵劑的除毒脫毒技術(shù)，可以成功將菜籽餅變?yōu)閮?yōu)質(zhì)添加飼料，直接按照1公斤發(fā)酵的棉菜籽餅（發(fā)酵前的重量）代替約0.85公斤豆粕進(jìn)行使用。飼料發(fā)酵劑中的有益微生物，在發(fā)酵過程中分泌的代謝產(chǎn)物，可將棉菜籽餅中的毒性物質(zhì)等有效分解。

豆粕、菜粕、棉粕成分對(duì)比

1.豆粕是一種高蛋白原料，無需脫毒即可用作飼料。其中蛋白質(zhì)含量為40%-48%，賴氨酸含量為2.5%-3.0%，色氨酸含量為0.6%-0.7%，蛋氨酸含量為0.5%-0.7%。2020年11月12日?qǐng)?bào)價(jià)每噸在3500元左右。

2.菜粕的粗蛋白含量在34%-38%之間，特點(diǎn)是蛋氨酸含量高（僅次于芝麻餅、粕），賴氨酸含量亦高。而精氨酸含量低，是餅、粕飼料中含量最低的。菜籽粕的有效能值偏低（淀粉含量低、菜籽殼難以消化利用）。礦物質(zhì)中，鈣和磷的含量均高，硒和錳的含量亦高。特別是硒的含量是常用植物飼料中最高的。2020年11月12日?qǐng)?bào)價(jià)每噸在2900元左右。

3.棉粕蛋白質(zhì)含量一般為44.32%，僅次于豆粕的蛋白質(zhì)含量48%，而高于菜籽粕的蛋白質(zhì)含量36.04%。精氨酸含量高達(dá)3.6%-3.8%，而賴氨酸含量?jī)H有1.3%-l.5%，只有豆粕的一半。2020年11月12日?qǐng)?bào)價(jià)每噸在3000元左右。

是否需要脫毒處理

1.豆粕無需經(jīng)過脫毒即可用作飼料。而且豆粕中富含蛋白質(zhì)和多種氨基酸，在不需要額外加入動(dòng)物性蛋白的情況下，僅豆粕中含有的蛋白質(zhì)和氨基酸足以平衡家禽和豬的食譜，促進(jìn)它們的營(yíng)養(yǎng)吸收。只有當(dāng)其他粕類單位蛋白成本遠(yuǎn)低于豆粕時(shí)，豆粕才有可能被替代。

2.菜粕菜籽中含有硫葡萄糖苷、芥酸、單寧、皂角苷等不良成分，其中主要是硫葡萄糖苷。硫葡萄糖苷本身無毒，但在一定溫度和水分條件下，經(jīng)過菜籽本身含有的芥子酶的酶解作用而產(chǎn)生異硫氰酸酯、唑烷硫酮和腈類等有害物質(zhì)。這些物質(zhì)可引起甲狀腺腫大，從而造成動(dòng)物生長(zhǎng)速度下降，繁殖力減退。單寧則妨礙蛋白質(zhì)的消化，降低適口性。而芥酸阻撓脂肪代謝，造成心臟脂肪蓄積及生長(zhǎng)受到抑制。。使用前需進(jìn)行一定的脫毒處理，并且使用時(shí)要加以限制，具體喂量應(yīng)根據(jù)菜粕中有害成分含量而定。經(jīng)過脫毒處理的菜籽粕喂量可以加大，而“雙低”油菜籽生產(chǎn)的菜粕喂量要受限制。同時(shí)，應(yīng)結(jié)合菜粕的氨基酸組成特點(diǎn)，適當(dāng)搭配其它餅粕。

3.棉籽中含有對(duì)動(dòng)物有害的棉酚及環(huán)丙烯脂肪酸，尤其是棉酚的危害很大。在制油過程中，由于蒸炒，壓榨等熱作用，大部分棉酚與蛋白質(zhì)、氨基酸結(jié)合而變成結(jié)合棉酚，結(jié)合棉酚在動(dòng)物消化道內(nèi)不被動(dòng)物吸收，故毒性很小。另一部分棉酚則以游離形式存在于餅、粕及油品中，這部分游離棉酚對(duì)動(dòng)物毒性較大，尤其單胃動(dòng)物過量攝取或攝取時(shí)間較長(zhǎng)，可導(dǎo)致生長(zhǎng)遲緩、繁殖性能及生產(chǎn)性能下降，甚至導(dǎo)致死亡。幼小動(dòng)物對(duì)棉酚的耐受能力更低。由于棉籽餅、粕中游離棉酚對(duì)動(dòng)物有害，因此，在使用棉餅、粕時(shí)，要根據(jù)飼喂對(duì)象及餅粕中游離棉酚的含量加以限量。反芻家畜在有優(yōu)質(zhì)粗料及多汁青料的情況下，棉籽餅、粕的用量不受限制，不會(huì)造成中毒。對(duì)單胃動(dòng)物要限制喂量，最好使用經(jīng)過脫毒處理的棉籽餅粕。同時(shí)，使用棉籽餅、粕配制飼糧要注意氨基酸平衡，尤其是棉籽餅、粕的賴氨酸含量低，且利用率差，應(yīng)注意添加賴氨酸。

發(fā)酵操作技術(shù)

發(fā)酵棉菜籽餅其實(shí)也是一個(gè)脫毒技術(shù)，具體操作如下：

1.仔細(xì)檢查棉菜籽餅，剔除棉菜籽餅中嚴(yán)重變質(zhì)發(fā)霉的部分，輕度發(fā)霉的原料可以忽略，因?yàn)槲⑸锇l(fā)酵能夠脫霉。

2.將棉菜籽餅粉碎并添加適量的玉米粉淀粉類的能量飼料等，調(diào)節(jié)飼料營(yíng)養(yǎng)比例。

3.每噸棉菜籽餅加入2公斤食鹽、玉米粉（其它淀粉、面粉次粉等也可以，或者粉碎的生紅薯300公斤也可以）100公斤、“99多功能飼料發(fā)酵劑”1包（500g/包，市場(chǎng)售價(jià)約25元，以高濃度乳酸菌、酵母菌、復(fù)合酶制劑的專業(yè)發(fā)酵劑）。

4.在混合物料中添加適量水分，使混合物料含水量保持在55%左右，以“手抓一把并緊握，無水滴落，松手后輕觸即散”為宜，一般上述配方中需要加入清水約500-600公斤。

5.發(fā)酵方式根據(jù)實(shí)際環(huán)境條件各異，在桶、缸、塑料袋等容器中發(fā)酵均可。

6.發(fā)酵時(shí)要盡可能排盡空氣進(jìn)行密封發(fā)酵。如果使用的發(fā)酵容器有密封不嚴(yán)實(shí)的隱患，要在一開始就在其外層包裹一層塑料袋并扎緊。發(fā)酵過程中不能啟封。

7.發(fā)酵時(shí)間受環(huán)境溫度影響，通常夏季發(fā)酵2-3天，冬季發(fā)酵5-7天即可完成。發(fā)酵完成后，有較為強(qiáng)烈的酸香味，ph值在3-4。

規(guī)模運(yùn)用混合發(fā)酵現(xiàn)場(chǎng)

塑料缸、飼料袋（有內(nèi)膜）均可做發(fā)酵飼料

發(fā)酵完成的棉菜粕飼喂動(dòng)物技術(shù)

需要注意的是，發(fā)酵后的飼料酸度較低，不可以取代禽畜全部日糧。其他類發(fā)酵飼料同理。飼喂時(shí)根據(jù)不同情況，將發(fā)酵飼料按照一定比例添加到日糧中，發(fā)酵完成的棉菜粕為濕料，具體使用量每大概1.5-2公斤發(fā)酵棉菜粕（濕料）代替動(dòng)物日糧配方中1公斤豆粕的使用量進(jìn)行代替使用，與其它飼料混合后直接飼喂，由于棉菜籽粕蛋白較高，最高使用量不要超過禽畜日糧飼喂量的40%（濕料重量）。如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵飼料過酸適口性變差，可在飼喂前在陽光下曬1-2小時(shí)，或添加適量的碳酸氫鈉（小蘇打）即可改善。

發(fā)酵過程中與發(fā)酵后使用過程中，發(fā)酵的容器要一直保持密封狀態(tài)，可以長(zhǎng)時(shí)間保存（一年左右）。

當(dāng)前養(yǎng)殖業(yè)成本高居不下，而飼料成本是其中最高的，利用廉價(jià)原料發(fā)酵飼料（包括一些輕度發(fā)霉的粕類低價(jià)收回）是極佳解決辦法。通過微生物飼料發(fā)酵劑的發(fā)酵作用，可以將輕度霉變飼料變成優(yōu)質(zhì)飼料，將不易消化的物質(zhì)分解為可被畜禽吸收的小分子糖類、氨基酸等。同時(shí)發(fā)酵飼料中富含有益微生物、酶制劑、酸化劑等，可調(diào)節(jié)畜禽腸胃微生態(tài)環(huán)境并進(jìn)一步提高飼料利用率。發(fā)酵飼料氣味清香，提高了飼料的適口性，加上發(fā)酵飼料中有大約4℃的酒度，能夠促進(jìn)動(dòng)物新陳代謝促進(jìn)健康抵御疾病，是當(dāng)前養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展中重要的一環(huán)。

本技術(shù)也可以同樣發(fā)酵菜籽粕（餅）、棕櫚粕等，方法同上。

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