魚(yú)粉供應(yīng)不足，價(jià)格居高不下，魚(yú)粉替代技術(shù)研究已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域熱點(diǎn)問(wèn)題，豆粕粗蛋白質(zhì)含量高、價(jià)格低且氨基酸分布相對(duì)平衡，是魚(yú)粉主要替代蛋白源之一,但豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子會(huì)損傷水生動(dòng)物腸道健康，降低水生動(dòng)物的生產(chǎn)性能，限制了其在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用。微生物發(fā)酵可最大限度消除豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子，增加豆粕中粗蛋白質(zhì)、小肽和游離氨基酸含量，并產(chǎn)生寡肽、谷氨酸、益生菌、維生素、乳酸、未知生長(zhǎng)因子等生物活性物質(zhì)顯示出比豆粕更好的魚(yú)粉替代效應(yīng)。近年來(lái)，在大口黑鱸、石斑魚(yú),凡納濱對(duì)蝦和異育銀鯽等水產(chǎn)養(yǎng)殖品種上的研究表明，以適宜比例發(fā)酵豆粕替代飼料中的魚(yú)粉，可以提高動(dòng)物消化酶活性、抗氧化能力以及免疫功能，改善肌肉品質(zhì)，且不會(huì)對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物生長(zhǎng)性能產(chǎn)生不利影響。

湘云鯽是由二倍體母本和異源四倍體父本雜交培育而來(lái)的三配體淡水新品種，具有食性廣、生長(zhǎng)迅速、抗逆性強(qiáng)、耐低氧、耐低溫等優(yōu)點(diǎn)，是目前國(guó)內(nèi)個(gè)體最大的優(yōu)質(zhì)鯽魚(yú)，市場(chǎng)潛力巨大，然而目前鮮有發(fā)酵豆粕在湘云鯽飼料中的應(yīng)用效果報(bào)道。基于此，本試驗(yàn)以發(fā)酵豆粕替代湘云鯽飼料中的部分魚(yú)粉和豆粕，研究其對(duì)湘云鯽生長(zhǎng)性能、腸道及肝臟健康的影響，為發(fā)酵豆粕在湘云鯽飼料中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

材料和方法

1.1試驗(yàn)飼料

以魚(yú)粉、肉粉、發(fā)酵豆粕、豆粕等為蛋白源，大豆油為脂肪源配制成2組等氮（37%）等脂（7.8%）的試驗(yàn)飼料，對(duì)照組為魚(yú)粉組（FM組），添加發(fā)酵豆粕的試驗(yàn)飼料為發(fā)酵豆粕替代組（FSM組）。為避免限制性氨基酸差異對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響，F(xiàn)SM組添加0.02%的蛋氨酸和0.1%的賴氨酸，使其蛋氨酸及賴氨酸含量與FM組近似相等。飼料組成及主要營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。飼料原料均購(gòu)于重慶新希望飼料有限公司，粉碎后過(guò)60目篩，用轉(zhuǎn)鼓式混合機(jī)混合均勻，制成直徑2.5mm的飼料，風(fēng)干后-20℃保存。

1.2試驗(yàn)魚(yú)飼養(yǎng)與管理

試驗(yàn)漁場(chǎng)，用1%食鹽消毒后，以商品飼料暫養(yǎng)1周。選擇體質(zhì)健康、個(gè)體均勻、體重為（37.26±0.16）g的試驗(yàn)魚(yú)160尾，隨機(jī)置于8個(gè)圓柱形水族缸，容積（500L）中，分為2組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)缸20尾。

每天8:30、12:30、17:00飽食投喂3次，養(yǎng)殖周期56d。養(yǎng)殖水源尾曝氣自來(lái)水，飼養(yǎng)期間水溫22～26℃，溶解氧>6.0mg/L，pH6.5～7.5，氨氮含量<0.5mg/L，亞硝酸鹽<0.05mg/L。

1.3樣品采集

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，停食24h，MS-222（0.01%）麻醉，分別計(jì)數(shù)、稱重。每重復(fù)隨機(jī)取5尾魚(yú)測(cè)定體重、體長(zhǎng)，從尾靜脈抽取靜脈血于EDTA-Na抗凝管中，靜置后4000g離心10min，取上層血漿存于-80℃冰箱中保存待用。每重復(fù)隨機(jī)取5尾魚(yú)，于冰盤(pán)中解剖，分離腸道、肝臟、肌肉，液氮速凍后于-80℃保存?zhèn)溆谩４送?，每重?fù)隨機(jī)取3尾魚(yú)，取前腸、肝臟于4%多聚甲醛中固定備用，用于石蠟切片的制備。

1.4數(shù)據(jù)分析

采用SPSS22.0對(duì)數(shù)據(jù)采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)比較分析組間差異，顯著水平為P<0.05。試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”（Mean±SD）形式表示。

試驗(yàn)結(jié)果

2.1發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，F(xiàn)M組與FSM組間湘云鯽的終末均重、增重率、特定生長(zhǎng)率、尾均攝食量、餌料系數(shù)、肥滿度、臟體比、肝體比、干物質(zhì)沉積率、蛋白質(zhì)沉積率和脂肪沉積率均無(wú)顯著差異（P>0.05）。 

2.2發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽體組成的影響

由表3可知，與FM組相比，F(xiàn)SM組湘云鯽肌肉粗蛋白質(zhì)含量顯著提高（P<0.05），粗灰分含量顯著降低（P

2.3發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽腸道健康的影響

2.3.1發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

由圖1可觀察到兩組腸道絨毛結(jié)構(gòu)均完整，無(wú)絨毛脫落現(xiàn)象。由表4可知，F(xiàn)M組與FSM組腸道絨毛數(shù)目與高度均無(wú)顯著差異（P>0.05）。

2.3.2發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽腸道黏膜通透性的影響

由表5可知，與FM組相比，F(xiàn)SM組血漿D-乳酸含量顯著降低了21.5%（P

2.3.3發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽腸道消化吸收功能的影響

由表6可知袁與FM組相比袁F(xiàn)SM組腸道脂肪酶活性顯著提高了10.2%（P

2.3.4發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽腸道抗氧化能力的影響

由表7可知，F(xiàn)SM組腸道總超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量與FM組間無(wú)顯著差異（P>0.05）。2.4發(fā)酵豆粕替代魚(yú)粉對(duì)湘云鯽肝臟結(jié)構(gòu)功能的影響

2.4.1發(fā)酵豆粕替代魚(yú)粉對(duì)湘云鯽肝臟形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽肝臟結(jié)構(gòu)影響見(jiàn)肝臟圖2。FM組和FSM組肝細(xì)胞索明顯，排列較整齊，肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整遙

2.4.2發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽血漿生化指標(biāo)的影響

由表8可知，與FM組相比，F(xiàn)SM組血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性、總膽固醇含量顯著降低（P<0.05），其中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性降低了11.3%，總膽固醇含量降低了23.1%，溶菌酶活性、免疫球蛋白M含量顯著提高（P

2.4.3發(fā)酵豆粕對(duì)湘云鯽肝臟抗氧化能力的影響

由表9可知，F(xiàn)M組與FSM組肝臟總抗氧化能力、總超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量均無(wú)顯著差異（P>0.05）。 

試驗(yàn)結(jié)論

綜上，在等氮等脂等賴氨酸等蛋氨酸前提下，以12%發(fā)酵豆粕替代飼料中部分魚(yú)粉和豆粕，可在不影響湘云鯽幼魚(yú)生長(zhǎng)性能及飼料利用的前提下，提高湘云鯽肌肉蛋白質(zhì)含量，促進(jìn)脂質(zhì)代謝，增強(qiáng)免疫機(jī)能。

實(shí)戰(zhàn)操作技術(shù)——棉菜籽餅脫毒變身優(yōu)質(zhì)飼料替代豆粕操作新技術(shù)

當(dāng)前豆粕價(jià)格很高有些地方貨源緊缺，而棉菜籽餅（棉籽粕、菜籽粕）價(jià)格相對(duì)便宜，棉菜籽餅是棉子、油菜籽榨油后剩下的餅狀殘?jiān)鞍踪|(zhì)含量較高，含有各種氨基酸成分。但由于棉菜籽餅中含有植酸、芥子堿等物質(zhì)，這些物質(zhì)含有一定的毒性，還會(huì)影響動(dòng)物的消化吸收，不能大量使用，因此不建議直接飼喂給動(dòng)物！

現(xiàn)在通過(guò)微生物飼料發(fā)酵劑的除毒脫毒技術(shù)，可以成功將菜籽餅變?yōu)閮?yōu)質(zhì)添加飼料，直接按照1公斤發(fā)酵的棉菜籽餅（發(fā)酵前的重量）代替約0.85公斤豆粕進(jìn)行使用。飼料發(fā)酵劑中的有益微生物，在發(fā)酵過(guò)程中分泌的代謝產(chǎn)物，可將棉菜籽餅中的毒性物質(zhì)等有效分解。

豆粕、菜粕、棉粕成分對(duì)比

1.豆粕是一種高蛋白原料，無(wú)需脫毒即可用作飼料。其中蛋白質(zhì)含量為40%-48%，賴氨酸含量為2.5%-3.0%，色氨酸含量為0.6%-0.7%，蛋氨酸含量為0.5%-0.7%。2020年11月12日?qǐng)?bào)價(jià)每噸在3500元左右。

2.菜粕的粗蛋白含量在34%-38%之間，特點(diǎn)是蛋氨酸含量高（僅次于芝麻餅、粕），賴氨酸含量亦高。而精氨酸含量低，是餅、粕飼料中含量最低的。菜籽粕的有效能值偏低（淀粉含量低、菜籽殼難以消化利用）。礦物質(zhì)中，鈣和磷的含量均高，硒和錳的含量亦高。特別是硒的含量是常用植物飼料中最高的。2020年11月12日?qǐng)?bào)價(jià)每噸在2900元左右。

3.棉粕蛋白質(zhì)含量一般為44.32%，僅次于豆粕的蛋白質(zhì)含量48%，而高于菜籽粕的蛋白質(zhì)含量36.04%。精氨酸含量高達(dá)3.6%-3.8%，而賴氨酸含量?jī)H有1.3%-l.5%，只有豆粕的一半。2020年11月12日?qǐng)?bào)價(jià)每噸在3000元左右。

是否需要脫毒處理

1.豆粕無(wú)需經(jīng)過(guò)脫毒即可用作飼料。而且豆粕中富含蛋白質(zhì)和多種氨基酸，在不需要額外加入動(dòng)物性蛋白的情況下，僅豆粕中含有的蛋白質(zhì)和氨基酸足以平衡家禽和豬的食譜，促進(jìn)它們的營(yíng)養(yǎng)吸收。只有當(dāng)其他粕類單位蛋白成本遠(yuǎn)低于豆粕時(shí)，豆粕才有可能被替代。

2.菜粕菜籽中含有硫葡萄糖苷、芥酸、單寧、皂角苷等不良成分，其中主要是硫葡萄糖苷。硫葡萄糖苷本身無(wú)毒，但在一定溫度和水分條件下，經(jīng)過(guò)菜籽本身含有的芥子酶的酶解作用而產(chǎn)生異硫氰酸酯、唑烷硫酮和腈類等有害物質(zhì)。這些物質(zhì)可引起甲狀腺腫大，從而造成動(dòng)物生長(zhǎng)速度下降，繁殖力減退。單寧則妨礙蛋白質(zhì)的消化，降低適口性。而芥酸阻撓脂肪代謝，造成心臟脂肪蓄積及生長(zhǎng)受到抑制。。使用前需進(jìn)行一定的脫毒處理，并且使用時(shí)要加以限制，具體喂量應(yīng)根據(jù)菜粕中有害成分含量而定。經(jīng)過(guò)脫毒處理的菜籽粕喂量可以加大，而“雙低”油菜籽生產(chǎn)的菜粕喂量要受限制。同時(shí)，應(yīng)結(jié)合菜粕的氨基酸組成特點(diǎn)，適當(dāng)搭配其它餅粕。

3.棉籽中含有對(duì)動(dòng)物有害的棉酚及環(huán)丙烯脂肪酸，尤其是棉酚的危害很大。在制油過(guò)程中，由于蒸炒，壓榨等熱作用，大部分棉酚與蛋白質(zhì)、氨基酸結(jié)合而變成結(jié)合棉酚，結(jié)合棉酚在動(dòng)物消化道內(nèi)不被動(dòng)物吸收，故毒性很小。另一部分棉酚則以游離形式存在于餅、粕及油品中，這部分游離棉酚對(duì)動(dòng)物毒性較大，尤其單胃動(dòng)物過(guò)量攝取或攝取時(shí)間較長(zhǎng)，可導(dǎo)致生長(zhǎng)遲緩、繁殖性能及生產(chǎn)性能下降，甚至導(dǎo)致死亡。幼小動(dòng)物對(duì)棉酚的耐受能力更低。由于棉籽餅、粕中游離棉酚對(duì)動(dòng)物有害，因此，在使用棉餅、粕時(shí)，要根據(jù)飼喂對(duì)象及餅粕中游離棉酚的含量加以限量。反芻家畜在有優(yōu)質(zhì)粗料及多汁青料的情況下，棉籽餅、粕的用量不受限制，不會(huì)造成中毒。對(duì)單胃動(dòng)物要限制喂量，最好使用經(jīng)過(guò)脫毒處理的棉籽餅粕。同時(shí)，使用棉籽餅、粕配制飼糧要注意氨基酸平衡，尤其是棉籽餅、粕的賴氨酸含量低，且利用率差，應(yīng)注意添加賴氨酸。

發(fā)酵操作技術(shù)

發(fā)酵棉菜籽餅其實(shí)也是一個(gè)脫毒技術(shù)，具體操作如下：

1.仔細(xì)檢查棉菜籽餅，剔除棉菜籽餅中嚴(yán)重變質(zhì)發(fā)霉的部分，輕度發(fā)霉的原料可以忽略，因?yàn)槲⑸锇l(fā)酵能夠脫霉。

2.將棉菜籽餅粉碎并添加適量的玉米粉淀粉類的能量飼料等，調(diào)節(jié)飼料營(yíng)養(yǎng)比例。

3.每噸棉菜籽餅加入2公斤食鹽、玉米粉（其它淀粉、面粉次粉等也可以，或者粉碎的生紅薯300公斤也可以）100公斤、“99多功能飼料發(fā)酵劑”1包（500g/包，市場(chǎng)售價(jià)約25元，以高濃度乳酸菌、酵母菌、復(fù)合酶制劑的專業(yè)發(fā)酵劑）。

4.在混合物料中添加適量水分，使混合物料含水量保持在55%左右，以“手抓一把并緊握，無(wú)水滴落，松手后輕觸即散”為宜，一般上述配方中需要加入清水約500-600公斤。

5.發(fā)酵方式根據(jù)實(shí)際環(huán)境條件各異，在桶、缸、塑料袋等容器中發(fā)酵均可。

6.發(fā)酵時(shí)要盡可能排盡空氣進(jìn)行密封發(fā)酵。如果使用的發(fā)酵容器有密封不嚴(yán)實(shí)的隱患，要在一開(kāi)始就在其外層包裹一層塑料袋并扎緊。發(fā)酵過(guò)程中不能啟封。

7.發(fā)酵時(shí)間受環(huán)境溫度影響，通常夏季發(fā)酵2-3天，冬季發(fā)酵5-7天即可完成。發(fā)酵完成后，有較為強(qiáng)烈的酸香味，ph值在3-4。

規(guī)模運(yùn)用混合發(fā)酵現(xiàn)場(chǎng)

塑料缸、飼料袋（有內(nèi)膜）均可做發(fā)酵飼料

發(fā)酵完成的棉菜粕飼喂動(dòng)物技術(shù)

需要注意的是，發(fā)酵后的飼料酸度較低，不可以取代禽畜全部日糧。其他類發(fā)酵飼料同理。飼喂時(shí)根據(jù)不同情況，將發(fā)酵飼料按照一定比例添加到日糧中，發(fā)酵完成的棉菜粕為濕料，具體使用量每大概1.5-2公斤發(fā)酵棉菜粕（濕料）代替動(dòng)物日糧配方中1公斤豆粕的使用量進(jìn)行代替使用，與其它飼料混合后直接飼喂，由于棉菜籽粕蛋白較高，最高使用量不要超過(guò)禽畜日糧飼喂量的40%（濕料重量）。如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵飼料過(guò)酸適口性變差，可在飼喂前在陽(yáng)光下曬1-2小時(shí)，或添加適量的碳酸氫鈉（小蘇打）即可改善。

發(fā)酵過(guò)程中與發(fā)酵后使用過(guò)程中，發(fā)酵的容器要一直保持密封狀態(tài)，可以長(zhǎng)時(shí)間保存（一年左右）。

當(dāng)前養(yǎng)殖業(yè)成本高居不下，而飼料成本是其中最高的，利用廉價(jià)原料發(fā)酵飼料（包括一些輕度發(fā)霉的粕類低價(jià)收回）是極佳解決辦法。通過(guò)微生物飼料發(fā)酵劑的發(fā)酵作用，可以將輕度霉變飼料變成優(yōu)質(zhì)飼料，將不易消化的物質(zhì)分解為可被畜禽吸收的小分子糖類、氨基酸等。同時(shí)發(fā)酵飼料中富含有益微生物、酶制劑、酸化劑等，可調(diào)節(jié)畜禽腸胃微生態(tài)環(huán)境并進(jìn)一步提高飼料利用率。發(fā)酵飼料氣味清香，提高了飼料的適口性，加上發(fā)酵飼料中有大約4℃的酒度，能夠促進(jìn)動(dòng)物新陳代謝促進(jìn)健康抵御疾病，是當(dāng)前養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展中重要的一環(huán)。

本技術(shù)也可以同樣發(fā)酵菜籽粕（餅）、棕櫚粕等，方法同上。

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