前言

近年來，隨著集約化、規模化養殖的迅速發展，動物免疫力下降、疾病頻發、用藥頻繁、畜產品質量降低等問題日漸凸顯，逐漸成為了消費者關注的焦點。因此，在動物飼糧中添加綠色添加劑來提高動物生長性能、增強免疫功能、調節腸道健康、改善肉品質成為目前的研究熱點。酶制劑、益生菌是動物生產中研究較為廣泛的飼料添加劑，具有提高動物生長性能、增強免疫力、改善腸道健康、提高肉品質等功能。研究表明，在生長豬飼糧中添加復合酶可顯著提高平均日增重（ADG）、干物質和氮的表觀消化率，顯著降低飼料成本。研究表明，在飼糧中添加復合酶（淀粉酶、蛋白酶、木聚糖酶）可調節腸道菌群平衡和腸道短鏈脂肪酸（SCFAs）水平。復合益生菌可顯著提高豬只生長性能，降低血清白介素6（IL-6）、干擾素γ（IFN-γ）及排泄物中NH和HS的濃度，調節SCFAs水平。目前有關酶制劑、益生菌等單一物質在動物生產中的應用較多，酶制劑、益生菌聯合應用的效果及機制有待深入研究。基于此，本試驗旨在研究飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長育肥豬生長性能、肉品質、抗氧化性能及腸道SCFAs的影響，以期為益生菌、酶制劑在養豬生產中的聯合應用提供科學依據。

01材料與方法

1.1試驗材料

復合益生菌由本實驗室自主培養制備，含植物乳桿菌、銀杏乳酸菌和釀酒酵母，每種菌添加量均為0.5×109CFU/kg。酶制劑提供，含有蛋白酶（活力為36000U/g）和淀粉酶（中溫α淀粉酶活力為1000U/g、普魯蘭酶活力為100U/g、糖化酶活力為8000U/g。

1.2試驗設計與飼糧

選取日齡和體重相近（約45kg）的健康生長豬（約克夏×榮昌）40頭，公母各半（公豬為閹公豬），隨機分為對照組和試驗組，每個組4個重復，每個重復5頭豬。對照組飼喂基礎飼糧，試驗組飼喂基礎飼糧+0.1g/kg酶制劑+1.5×109CFU/kg復合益生菌。試驗預試期3天，正試期63天。試驗期間自由采食與飲水，免疫和飼養管理按常規方法進行。每天監測豬群的健康狀況，記錄豬的死淘情況。基礎飼糧為玉米-豆粕型無抗基礎飼糧，參照《豬營養需要量》（GB/T39235—2020）配制，飼糧組成及營養成分見表1。

1.3樣品采集及指標測定

1.3.1生長性能

試驗期間，每天記錄各重復采食量，計算平均日采食量（ADFI）；在正式試驗開始第1天和第63天早晨空腹8小時以上后稱重，計算ADG和耗料增重比（F/G）。計算公式：

ADG（kg/d）=總增重/試驗天數

ADFI（kg/d）=飼糧消耗量/試驗天數

F/G=累計飼料消耗量/（末重−初重）

1.3.2肉品質

在試驗第63天早晨，每個重復選取1頭接近平均體重的豬，空腹8h以上后屠宰，取左側胴體背最長肌，參照《豬肉品質測定技術規程》（NY/T821—2019）進行肉品質檢測。

1.3.3血清免疫指標

在試驗第63天早晨，每個重復選取l頭接近平均體重的豬，采集頸靜脈血10mL，置于促凝采血管中，靜置2~3h后4℃、3000r/min離心10min，取上清液分裝到1.5mL離心管中，并于-20℃保存備用。按照南京建成科技有限公司試劑盒說明書測定豬血清中免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）和細胞因子（IL-1β、IL-2、IL-6、IL-10）的含量，測定儀器為酶標儀（SynergyH1，GeneCompanyLimited）。

1.3.4肌肉抗氧化指標

屠宰后取左側胴體背最長肌，按照試劑盒說明書檢測肌肉丙二醛（MDA）、還原性谷胱甘肽（GSH）含量及總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化酶（GSH-Px）等指標。測定儀器為酶標儀（SynergyH1，GeneCompanyLimited）。

1.3.5盲腸內容物

SCFAs屠宰后迅速結扎盲腸兩端，取盲腸中段內容物分裝于數個無菌EP管中，液氮速凍后置于-80℃冰箱中保存待測。采用氣相色譜-質譜聯用儀（GC-MS）測定盲腸內容物中SCFAs含量。

1.4統計分析

試驗數據采用SPSS26.0統計軟件進行分析，分析方法為獨立樣本t檢驗。結果采用平均值±標準誤表示，其中，P>0.05為差異不顯著，P<0.05為差異顯著，0.05≤P<0.10作為趨勢性判斷標準。

02試驗結果

2.1飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長育肥豬生長性能的影響

由表2可知，與對照組相比，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑有提高豬只末重（P=0.09）、降低ADFI（P=0.09）和F/G（P=0.08）的趨勢，對ADG無顯著影響（P>0.05）。

2.2飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長育肥豬肉品質的影響

由表3可知，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑可提高生長育肥豬屠宰后肌肉pH1、降低滴水損失（P

2.3飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長育肥豬血液免疫指標的影響

由表4可知，與對照組相比，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑可提高生長育肥豬血清中IgA、IgG以及細胞因子IL-2、IL-10水平（P

2.4飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長育肥豬肌肉抗氧化性能的影響

由表5可知，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長育肥豬肌肉抗氧化性能均無影響（P>0.05）。

2.5飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長育肥豬盲腸SCFAs的影響

由表6可知，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長育肥豬盲腸SCFAs、含量無影響（P>0.05）

03討論

3.1飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長育肥豬生長性能的影響

研究表明，動物飼糧中添加酶制劑和益生菌可提高其生長性能。研究發現，在生長育肥豬飼糧中添加0.01%蛋白酶可顯著提高ADG、顯著降低F/G。研究表明，在斷奶仔豬飼糧中添加復合益生菌（枯草芽孢桿菌、糞腸球菌）可顯著提高ADG、ADFI，顯著降低F/G。此外，在生長豬飼糧中添加復合酶（木聚糖酶、β-葡聚糖酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶和植酸酶）可顯著提高鈣和磷的表觀回腸消化率以及粗蛋白質、鈣和磷的表觀總消化率，從而提高其生長性能。本研究表明，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑有提高豬只末重、降低ADFI和F/G的趨勢，說明飼糧中添加復合益生菌和酶制劑具有提高生長育肥豬生長性能的作用。這可能是因為外源益生菌在動物腸道定植后，可增強動物腸道微生物代謝；酶制劑可補充動物體內含量不足和一些動物自身不能合成的酶。由此可見，在飼糧中添加益生菌和酶制劑能促進營養物質的消化吸收，從而提高動物的飼料轉化3.2飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長育肥豬肉品質的影響

肉品質是決定豬肉價值的重要因素。pH可通過調控蛋白質活性影響肉的顏色、持水力。在本試驗中，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑可顯著提高豬肉pH，但對肉色L*、肉色a*、肉色b*沒有顯著影響。持水力又稱系水力，對肉的嫩度、顏色和營養組成都有影響。本試驗表明，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑可顯著降低肌肉滴水損失，說明飼糧中添加復合益生菌和酶制劑可改善豬肉持水力，進而改善豬肉品質。發現，在斷奶仔豬飼糧中添加植物乳桿菌ZJ316可改善肌肉pH、硬度、黏性、咀嚼性和恢復力。表明在育肥豬飼糧中添加復合益生菌可提高肉色、降低滴水損失。也表明，育肥豬飼喂復合益生菌（枯草芽孢桿菌、釀酒酵母和羅伊氏乳桿菌）固態發酵飼料可顯著降低豬肉的剪切力和滴水損失。綜合分析表明，在飼糧中添加益生菌和酶制劑可改善豬肉品質。

3.3飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長育肥豬血液免疫指標的影響

血清免疫指標可反映動物機體的免疫水平、代謝情況及健康狀況。研究發現，在斷奶仔豬飼糧中添加復合酶（淀粉酶、蛋白酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶）可顯著提高血清IgA、IgG和IgM濃度。研究表明，斷奶仔豬飼喂釀酒酵母發酵菜籽粕可顯著降低血清IL-1β、IL-6濃度，顯著增加IFN-γ濃度。研究表明，在斷奶仔豬飼糧中添加復合益生菌（丁酸梭菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌）可顯著降低血清腫瘤壞死因子α（TNF-α）和IL-1β濃度。本試驗也表明與對照組相比，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑可顯著提高血清IgA、IgG、IL-2和IL-10水平。免疫球蛋白具有抗菌、抗病毒、抗感染等作用，白細胞介素是參與機體炎癥反應的重要因子，血液免疫球蛋白、白細胞介素濃度可以反映機體的免疫水平和健康狀況。分析可見，飼糧中添加復合益生菌與酶制劑可通過提高血液免疫球蛋白、白細胞介素的濃度增強動物的血液免疫功能，從而保證機體健康。

3.4飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長育肥豬肌肉抗氧化性能的影響

T-AOC、SOD、GSH和MDA都是機體抗氧化系統中的重要指標。T-AOC反映了機體內各種抗氧化分子的總體水平及機體的健康狀況。SOD是一種以超氧化物自由基為底物的重要抗氧化酶。GSH是反映機體所處氧化還原狀態的重要指標。MDA是脂質氧化的終產物，可反映機體內脂質過氧化程度及細胞損傷程度。研究發現，在飼糧中添加復合酶（真菌α-淀粉酶、酸性蛋白酶、木聚糖酶、β-甘露糖酶、葡萄糖氧化酶、酸性纖維素酶和半乳糖苷酶）可顯著提高仔豬肝臟和血清中GSH-Px濃度，顯著降低MDA濃度。研究表明，飼糧中添加益生菌（植物乳桿菌B90、釀酒酵母）和益生元（木糖、木三糖和木四糖）可提高斷奶仔豬結腸和血漿過氧化氫酶（CAT）、GSH-Px、SOD水平，降低結腸和血漿MDA、過氧化氫水平。研究表明，在飼糧中添加益生菌（丁酸梭菌、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌）和益生元（酵母細胞壁、低聚木糖）可顯著提高豬只背最長肌SOD活性、顯著降低臀部肌肉MDA活性。Li等研究結果表明，飼糧中添加益生菌可顯著降低斷奶仔豬脾臟、肝臟和空腸黏膜的MDA含量，顯著提高肝臟和回腸黏膜的T-AOC。本試驗結果表明，飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長育肥豬抗氧化性能無顯著影響。由T-AOC、MDA、GSH等抗氧化分子組成的非酶類抗氧化系統和由GSH-Px、SOD、CAT等氧化還原酶組成的酶類抗氧化系統共同調控機體的抗氧化性能。因此，飼糧中添加酶制劑、益生菌可通過調節MDA含量、T-AOC和SOD、CAT等酶活性調控機體的抗氧化性能。

3.5飼糧中添加復合益生菌和酶制劑對生長育肥豬盲腸SCFAs的影響

SCFAs是腸道微生物發酵利用食物中不可消化的碳水化合物的重要產物，主要包括乙酸、丙酸、丁酸等由1~6個碳原子組成的有機脂肪酸，具有調節腸道菌群平衡、增強腸道屏障功能、參與脂質代謝、提高免疫力等生物學功能。研究發現，飼糧中添加菊粉和益生菌（釀酒酵母、乳酸菌）可改變豬腸道SCFAs的組成。研究表明，飼糧中添加復合酶（淀粉酶、蛋白酶和木聚糖酶）可顯著提高仔豬盲腸和結腸乙酸、丙酸及總SCFAs含量。研究也表明，飼糧中添加益生菌（腸球菌、乳酸菌和雙歧桿菌）可顯著增加結腸乙酸含量。本試驗中，生長育肥豬飼糧中添加復合益生菌和酶制劑可增加盲腸丁酸含量，但差異不顯著。這可能與復合益生菌和酶制劑組成或添加量有關研究發現，在生長豬飼糧中添加不同含量復合益生菌（地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、釀酒酵母）對腸道SCFAs的影響不同，隨著日糧中復合益生菌含量的增加，乙酸鹽、丁酸鹽和總SCFAs濃度呈線性增加，說明復合益生菌對腸道SCFAs的影響與益生菌的添加量有關。

4、結論

本試驗結果表明，生長育肥豬飼糧中添加0.1g/kg酶制劑和1.5×109CFU/kg復合益生菌可提高其生長性能和免疫水平，改善肉品質。

養殖專用加酶復合益生菌，養豬復合益生菌，養雞復合益生菌，鴨鵝養殖復合益生菌，牛羊養殖復合益生菌，特種動物養殖復合益生菌，水產養殖復合益生菌

本產品運用復合益生菌與復合酶制劑具有使用量少，對動物腸道有保健效果，還可以提高對飼料的消化吸收率，減少養殖環境臭氣、氨氣的產生，促進動物糞便恢復成形。

【適用對象】畜禽、各種特種養殖動物、水產動物

【產品成分分析保證值】枯草芽孢桿菌、乳酸片球菌、沼澤紅假單胞菌等等合計≥200億cfu/g，水分＜9.0%。凈重：500克/袋。

使用說明書

【產品功能與特點】

◆改善腸道內環境和微生態環境，抑制毒胺或氨的產生降低養殖欄舍中的臭味氨氣濃度；凋節動物體內微生態平衡，對動物腸道內有保健作用。

◆提高飼料效率，增強消化吸收，促進生長，提高飼料報酬，降低養殖成本，使用后動物糞便的排泄量會減少，糞便逐漸恢復成形。

◆抗應激：能夠減少飼養動物因環境條件劇變惡化而產生的應激，提高成活率。

◆凈化養殖環境，形成清潔養殖環境：排泄物中一樣保持有活菌，能夠在養殖環境中繼續繁殖，并自動進行發酵，抑制環境中病原菌的生長，減少糞便的氨味、臭味、凈化環境，減輕污染。

◆能夠減輕或消除霉菌毒素對動物的毒害作用，清除動物體內藥物激素殘留，改善肉蛋品質，恢復自然養殖風味。

◆水產動物飼料中使用本品后，能夠減緩水質惡化或有助于水體有益微生物繁殖，改善水質，對水產動物腸道有保健功能。

【使用方法】

①養豬上的運用：種豬、母豬、肉豬每噸飼料中使用500克。

②家禽上的運用：肉禽蛋禽每噸飼料使用500克。

③兔子、牛、羊、馬等草食動物、水產養殖上的運用：每噸精飼料中添加500克。

④各種特種養殖動物上的運用：每噸飼料中添加1000克。

⑤飲水，每1000公斤清水加入本品200克，2小時后飲用。

⑥飼料廠生產全價飼料：每噸飼料中添加1000克（可以高溫制粒）。

【注意事項】

①飼喂動物先溶于5倍以上的溫水中2小時后，再混合于飼料原料中效果更好；本產品采用多層包被和耐高溫菌種，高溫制粒對本產品稍有影響但不大，稍微加大使用量即可。

②使用過程中，動物的免疫程序、衛生防疫照常進行，大劑量在飼料中投喂抗生素時對效果有影響但可以繼續使用本品（部分益生菌和酶制劑會繼續產生效果），但不會產生副作用。

③周圍疫情高發期增加一倍的使用量。

【包裝規格】500g/包，40包/箱。